PROTOCOLO
La prueba debe ser
realizada en presencia de personal médico cualificado, preferiblemente
bajo la supervisión de un médico. Según el método
analítico utilizado para la determinación, se deberá
seleccionar un contenedor adecuado (tubo o bolsa) para la toma de muestras.
El
método analítico también determinará el número
de muestras en cada momento de muestreo y el volumen de muestra necesario
para la determinación.
El paciente
debe acudir a la visita del facultativo por la mañana. La prueba
deberá ser realizada con el paciente en estado de ayuno (tanto
líquido como sólido) durante 8 horas como mínimo,
preferentemente durante la noche. El paciente debe descansar durante diez
minutos antes de la prueba. Mientras se está realizando la prueba,
el paciente estará sentado.
1. El procedimiento
se inicia con el etiquetado del recipiente de muestreo y la toma de la
muestra inicial (basal).
2. El paciente
expulsará el aire suavemente pero de forma continua en el interior
del contenedor de muestras, que será cerrado inmediatamente. En
el caso de que las muestras de aliento sean analizadas utilizando el espectrofotómetro
de infrarrojos, se recomienda que en los momentos inmediatamente anteriores
a la toma de muestras, el paciente contenga la respiración durante
unos segundos.
3. La solución
de prueba se prepara vaciando el contenido del sobre que contiene 13C-urea
en el interior de un vaso que contenga 100 ml de agua de bebida y disolviendo
el producto. Debe desecharse la solución en el caso de que ésta
no sea transparente o cuando la urea no esté completamente disueltos.
4. Inmediatamente
después de la disolución completa, el paciente ingerirá
el contenido completo del vaso rápidamente.
5. El facultativo
a cargo de la prueba debe anotar el momento de la ingestión.
6. Después
de la ingestión, el paciente se enjuagará la boca 2 ó
3 veces con agua con el fin de eliminar cualquier cantidad residual de
13C-urea en la boca. De esta manera, se intentan evitar posibles resultados
falsos de la prueba.
7. El paciente
cambiará de posición a decúbito lateral izquierdo
durante 5 minutos y posteriormente permanecerá sentado hasta el
segundo muestreo.
8. Transcurridos
20 minutos de la ingestión de la solución de prueba, se
recogerá la segunda muestra respiratoria en el contenedor debidamente
etiquetado, del mismo modo que se describe en el punto 2.
Análisis
de las muestras respiratorias y especificaciones de análisis:
El aumento
del 13C en la respiración se expresa como una diferencia absoluta
[valor D 13CO2 (‰)] entre el cociente 13C/12C antes de la administración
de la urea (valor basal) y 20 minutos después de la administración.
Si el valor D 13CO2 es igual o superior a 2,5 (‰), el paciente
se considera infectado por H. pylori.
Si se realiza
la prueba en las condiciones que se han descrito, la prueba de aliento
con urea alcanza una sensibilidad del 98,2% [IC del 95%: 94,8 al 99,6%]
y una especificidad del 97,9% [IC del 95%: 88,9 al 99,9%] cuando se compara
con un patrón de referencia basado en métodos invasivos.
Se han validado
dos métodos analíticos, espectrofotometría de infrarrojos
(EIR) y cromatografía de gases y espectrofotometría de masas
del cociente de los isótopos (CG/EMIR), en los estudios clínicos
con pruebas de aliento con urea.
Debe asegurarse
que la concentración de CO2 o el cociente 13C/12C no varíe
desde el momento de la espiración hasta el análisis de las
muestras de aliento. Esto ocurre cuando se utilizan contenedores con extractores
de humedad; por tanto, tales contenedores deben evitarse.
Especificaciones
para la determinación del cociente 13C/12C:
a. Validación
de espectrofotometría de infrarrojos:
- Rango
de concentración de CO2: 1%-6%.
- Linealidad:
y= 1,01x-0,20; r2=1.000.
- Sensibilidad:
0,5 ‰ (límite de detección de D 13C).
- Reproductibilidad:
DE: + 0,5 ‰ o inferior a una concentración de CO2 del
3% en el aire espirado.
- Exactitud:
- Error
de medición: + 0,5 ‰ o inferior (en D 13C: 0-50‰).
- Error
de medición: + 1 ‰ o inferior (en D 13C: 100 ‰).
b. Validación
de la cromatografía de gases y espectrofotometría de masas
del cociente de los isótopos:
- Rango
de concentración del CO2: 1%-5% CO2 (para un volumen de muestra
de aire de 10 ml.
- Linealidad:
y = 1,0183x + 0,5686; r2 = 1.000.
- Sensibilidad:
0,2 ‰ (límite de detección de D 13C).
- Reproductibilidad:
DE (d 13C): + 0,2 ‰ o inferior a una concentración de
CO2 del 3% en el aire espirado.
- Exactitud:
DE (d 13C, n = 5): + 0,3 ‰ o inferior a una concentración
de CO2 entre el 1 y el 5% en el aire espirado.
El gas de
referencia debe normalizarse frente a un patrón de referencia internacional
adecuado para permitir la comparación de resultados entre laboratorios.
Explicación
de los resultados:
d 13C: diferencia
en partes por mil (‰) respecto a un patrón internacional
aceptado.
D 13C, D
13CO2: diferencia entre las determinaciones de las muestras antes y después
de la administración de 13C-urea.
El paciente
se diagnostica como no infectado si el valor es inferior al 2,5 ‰.
|
